陕西动物组织免疫组化

时间:2024年05月27日 来源:

免疫组化在什么情况下进行组织抗原修复,抗原修复的条件是什么? 

(1)由于组织中部分抗原在甲醛或多聚甲醛固定过程中,发生了蛋白之间交联及醛基的封闭作用,从而失去抗原性。通过抗原修复,使得细胞内抗原决定族重新暴露,提高抗原检测率。

(2)修复方法从强到弱一般分为三种,高压修复、微波修复、胰酶修复。修复液也分为若干种(具体的可以查阅相关资料,大量的:中性的、高pH的等)。

(3)微波修复,我们一般用6min*4次,效果不错。

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病理医师日常工作中经常说的一句话应该就是“做个免疫组化吧”;不管是临床医师,还是患者,他们问的多的问题则是“为什么要做免疫组化?”病理医师通过“特殊染色”来进行细胞的识别。这一做法的依据是特定细胞和组织中的成分不同、则化学性质不同,通过染色的方法则可以呈现不同颜色。不过,由于组织固定或储存等,会造成相应物质的活性降低甚至消失,因而限制了特殊染色方法的应用。随着免疫学研究的进展,根据抗原与相应抗体间特异性结合的性质,则有了现在免疫组化的方法:不同细胞、不同组织中抗原有一定差异,抗体与被测组织中的特定抗原结合,进而通过一定显色方法将结合的抗体显示出来。如有相应显色,则证实可能有被测抗原;无显色则可能无被测抗原。当然,这一方法中需注意相应的“例外”,如抗体的非特异性结合、非特异性显色,则容易造成“假阳性”;或者虽有相关抗原、但所用抗体与该抗原并未结合等,则容易造成“假阴性”。随着免疫组化的应用经验的增加,这些问题在常规应用中尽量得以避免,前者如各种显色方法的优化;后者如抗原修复方法的优化、新型抗体开发及选择。福建做得好的免疫组化要多久英瀚斯生物,专业病理染色切片平台,免疫组化效果好!

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细胞属性的判定,免疫组化也可以进行这方面的临床应用。通过特定抗体标记出细胞内相应的抗原成分,来判定细胞的属性,确定cancer的来源。如细胞角蛋白(CK)是上皮性标记,CK阳性提示cancer为上皮源性cancer;降钙素抗体是甲状腺髓样cancer特有的标记;甲状腺球蛋白(Tg)阳性提示是甲状腺滤泡性cancer;前列腺特异性抗原(PSA)只见于前列腺上皮;胶质纤维酸性蛋白(GFAP)阳性则提示胶质cancer;CD20和CD79a阳性则提示B细胞淋巴瘤;平滑肌肌动蛋白(Actin)阳性提示cancer为平滑肌源性;胃肠道间质瘤中原cancer基因蛋白产物CD117阳性;血管源性cancer中内皮细胞标记物CD34阳性等等。如果您需要做实验外包,可以与我们英瀚斯生物进行联系。

免疫组化中免疫胶体金技术,英瀚斯生物小编为您说明介绍。免疫胶体金技术是以胶体金这样一种特殊的金属颗粒作为标记物。胶体金是指金的水溶胶,它能迅速而稳定地吸附蛋白,对蛋白的生物学活性则没有明显的影响。因此,用胶体金标记一抗、二抗或其他能特异性结合免疫球蛋白的分子(如葡萄球菌A蛋白)等作为探针,就能对组织或细胞内的抗原进行定性、定位,甚至定量研究。由于胶体金有不同大小的颗粒,且胶体金的电子密度高,所以免疫胶体金技术特别适合于免疫电镜的单标记或多标记定位研究。由于胶体金本身呈淡至深红色,因此也适合进行光镜观察。如应用银加强的免疫金银法则更便于光镜观察。英瀚斯生物,可做免疫组化定量分析。

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细胞爬片免疫组化检测实验步骤

1、选择贴壁良好的细胞爬片,用4%多聚甲醛固定后15min后自然晾干。

2、PBS洗3次,每次5min。3、切片放入3%过氧化氢溶液,室温下孵育10min,以阻断内源性过氧化物酶。

4、PBS洗3次,每次5min,甩干后5%BSA封闭20min(封闭电荷)。

5、去除BSA液,每张切片加入50μl稀释的一抗覆盖组织,4℃过夜。

6、PBS洗3次,每次5min。


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7、去除PBS液,每张切片加50μl-100μl相应种属的二抗,4℃孵育50min。

8、PBS洗3次,每次5min。

9、去除PBS液,每张切片加50-100μl新鲜配制DAB溶液,显微镜控制显色。

10、显色完全后,蒸馏水或自来水冲洗,苏木素复染,1%盐酸酒精分化(1s),自来水冲洗,氨水返蓝,流水冲洗。

11、切片经过梯度酒精(70-100%)10min一个梯度,脱水干燥,二甲苯透明,中性树胶封固。 免疫组化相关知识汇总。陕西做得好的免疫组化要多少钱

如何做好免疫组化实验?陕西动物组织免疫组化

免疫组化的发展路程?在临床病理诊断中,免疫组织化学(IHC)是一种很重要的技术和手段,从20世纪70年代开始,免疫组化技术就应用于病理诊断,对于诊断cancer、cancer分类、判断预后产生了巨大的影响,同时也扩展了人们对于各种疾病及cancer形成过程的认识,提高了病理诊断与研究水平。但是,随着免疫组化的广泛应用,发现免疫组化技术存在一些局限性。深入研究免疫组化原理和技术,必须熟悉各种抗体真阳性反应部位,实现实验室间免疫组化标准化,使免疫组化在病理诊断中发挥比较大的辅助作用。如果您有免疫组化相关的实验,可以与我们英瀚斯生物进行联系。陕西动物组织免疫组化

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