免疫组化荧光染料ICG
异硫氰酸荧光素(FITC)是一种有机荧光染料,目前,这种荧光染料仍用于免疫荧光和流式细胞术中。在495/517nm处,该染料会产生激发/发射峰值,并可借助异硫氰酸盐反应基团与不同抗体结合,该基团可以和蛋白质上的氨基、巯基、咪唑、酪氨酰、羰基等基团相结合。而它的基本成分——荧光素,其摩尔质量为332g/mol,常被用作荧光示踪剂。FITC(389g/mol)是用于荧光显微镜技术的首批染料,且其被当成AlexaFluor®488等后续荧光染料的发端。该染料的荧光活性取决于它的大共轭芳香电子系统,而该系统受蓝色光谱中的光所激发。经常与FITC同时使用的另一种染料是与其相似的TRITC[四甲基罗丹明-5(6)-异硫氰酸]。与FITC相反,TRITC并非荧光素,而是罗丹明家族的衍生物。罗丹明也具有一个大的共轭芳香电子系统,正是该系统引发了它们的荧光行为。还有一点与FITC相反,TRITC(479g/mol)由比较**长为550nm的绿色光谱中的光所激发,它的比较大发射波长为573nm。与蛋白质(例如,抗体)结合也基于异硫氰酸盐反应基团。目前常用标记蛋白/抗体的荧光素主要有BODIPY类、香豆素类、罗丹明类、近红外类、NBD胺类以及菁染料等。免疫组化荧光染料ICG
绿色荧光染料ICG的主要作用吲哚菁绿(IndocyanineGreen,简称ICG)是一种广泛应用于医学和生物领域的荧光染料。它具有独特的化学结构和性质,因此被***用于荧光显像、光热***、生物识别和药物输送等领域。吲哚菁绿的绿色溶解度是其在水中的溶解度,它是衡量该染料在溶液中的溶解能力的重要指标。吲哚菁绿具有较好的水溶性,可以在水中迅速溶解,形成稳定的溶液。这一特性使得吲哚菁绿在医学诊断和***中得到广泛应用。吲哚菁绿的主要作用之一是在医学影像学中作为造影剂。由于其具有强烈的荧光特性,能够在近红外光谱范围内吸收和发射光线,因此被***用于近红外荧光显像技术中。在临床中,医生可以通过注射吲哚菁绿溶液,利用近红外光源对患者进行显像,以观察和评估病变部位的血液灌注情况、淋巴引流途径等。这为医生提供了非侵入性、实时性的影像信息,有助于准确诊断和指导***。此外,吲哚菁绿还在光热***中发挥着重要作用。光热***是一种利用光热效应杀灭肿瘤细胞的方法。吲哚菁绿可以吸收近红外光并将其转化为热能,从而使附近的肿瘤细胞受热破坏。这项技术在*****中具有巨大潜力,因为它可以实现高度精细的***,同时比较大限度地减少对周围正常组织的损伤。免疫组化荧光染料ICGCy3 (Cyanine 3) 是一种发橘黄色荧光的花青素荧光染料。
选择荧光染料时要考虑那些因素:激发波长处的消光系数应尽可能高:消光系数是衡量可以吸收多少光子的量度。量子产率应该尽可能高:这是吸收光子与发射光子的比率。消光系数和量子产率的乘积就是亮度。荧光染料应该是光稳定的:遗憾的是,比较不同公司染料的光稳定性的研究并不多。光致变色行为:对于STORM实验,您需要一个闪烁的荧光团。但是,对于分子跟踪实验,您***不想要闪烁的荧光团。活/死细胞渗透性。您想要的反应侧基(例如HaloTag、抗体等)。当您使用多个荧光探针时,尤其是当您量化共定位时,请谨慎处理其他颜色通道中的渗色。单独测试所有荧光探针以评估渗透。
3.粘壁细胞的染色(1)使粘壁的细胞在无菌实验室培养。(2)从培养基中移走盖玻片,吸走过量培养液,将盖玻片放在潮湿的环境中。(3)在盖玻片的一角加入100μL的染料工作液,轻轻晃动使染料均匀覆盖所有细胞。(4)在37℃培养细胞2~20分钟,不同的细胞比较好培养时间不同。(5)吸干染料工作液,用培养液洗盖玻片2~3次,每次用预温的培养基覆盖所有细胞,培养5~10分钟,然后吸干培养基。
4.显微镜检测(1)DiD,DiO,DiI,DiR和DiS滤光器的选择参见表1。(2)多色染料的同时检测,滤光器按照以下设定:a)DiI和DiO=OmegaXF52,Chroma51004;b)DiI和DiD=OmegaXF92,Chroma51007;c)DiI,DiO和DiD=OmegaXF93,Chroma61005
5.流式细胞仪的检测DiD,DiO,DiI,DiR和DiS染色的细胞可以分别用经典的FL1,FL2,FL3和FL4流式细胞仪检测。 花青类荧光染料属于共振染料,其特征在于具有离域电荷的氮原子(两个氮原子)之间的聚甲炔染料。
荧光标记技术是指运用荧光染料与待研究对象结合,利用它的荧光特性,提供待研究对象相关信息。荧光标记具有操作简便、高稳定性、高灵敏度等优势,使荧光染料在生命科学研究中应用,包括:标记活细胞或固定细胞中的蛋白质、多肽;作为功能性指示剂表征细胞健康状况;设计各种荧光探针,寻找特定蛋白或药物靶点。应用分类:多肽、蛋白、抗体标记:氨基标记、巯基标记、羧基标记;***成像:水溶性/脂溶性荧光染料、近红外I区/II区荧光染料南京星叶生物科技有限公司提供不同用途的荧光染料,了解更多(包括但不限于)
荧光染料,由于灵敏度高,操作方便,逐渐取代了放射性同位素作为检测标记,其应用于荧光探针,细胞染色等。上海荧光染料细胞核
脂溶性荧光染料cy3、cy5、cy7等。免疫组化荧光染料ICG
小动物***荧光成像技术是现***物医学研究领域的一项重要技术,因其具有操作简单、实时直观、灵敏度高、实验成本低等特点,已广泛应用于生命科学、医学研究及药物开发等方面。纳米材料在生物医学领域得到广泛应用,旨在解决传统医学面临的各种医学挑战,包括生物利用度差,靶向特异性受损,全身和***毒性等。纳米材料具有很多与众不同的优点,比如多功能性、大的负载量、靶向性、血液循环时间长等。纳米材料在生物医学中起着关键作用,可以有效携带成像探针、***剂或生物材料并传递至靶点,如特定的***、组织甚至细胞。光学成像主要包括生物发光(bioluminescenceimaging,BLI)和焚光成像(fluorescenceimaging,F1)两种技术。前者利用焚光素酶基因(如FLUC,RLUC,GLUC)标记细胞或DNA,其表达产物与莖火虫素类底物反应产生荧光。后者包括多种荧光蛋白基因(如GFP,RFP,YFP等)、有机荧光染料、荧光上转换纳米粒子、量子点等的应用。 免疫组化荧光染料ICG
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