南京默克4ml超滤浓缩管报价

时间:2020年10月18日 来源:

Amicon® Pro纯化超滤管简明操作指南

亲和纯化

用于纯化GST•Tag,His•Tag等重组表达蛋白及抗体,适合~0.5 mL裂解液操作

6次低速离心,总耗时~100分钟(含65分钟孵育时间)

1. 在Amicon® Pro上样池中加入200μL亲和纯化树脂(50%悬浊液)和1.5 mL漂洗缓冲液。

1,000×g离心1 min。

2. 加入0.5 mL样品并与树脂吸打混匀。孵育1 h,其间可温和搅动促进结合。

3. 1,000×g离心1 min 以去除未结合杂质。

4. 加入1.5 mL漂洗缓冲液,1,000×g离心1 min。 超滤浓缩管直销公司。南京默克4ml超滤浓缩管报价

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通量(超滤效率)及其影响因素

超滤过程中需要在速率和回收率之间平衡以期获得比较好的效果。滤膜的

通量的定义是流量除以面积,使用高 NMWL 滤膜可以增加通量,但同时

会降低回收率。选择膜和装置时需要同时考虑截留分子量和通量。而参

与影响通量的因素很多,包括:

压力:较为稀释的蛋白溶液或胶体悬液进行超滤时,流量随着跨膜压力

(TMP)的增大而增加。正压条件下操作,如 Stirred Cell 搅拌式超滤杯,

这种因素影响较为明显。如果极化影响***,通量会达到一个平台,甚

至可能随着压力的增加而降低。 虹口区Millipore超滤浓缩管代理价你知道上海超滤浓缩管代理销售哪家比较好吗?

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蛋白如果浓缩过快或者过度浓缩都有可能引起蛋白沉淀。建议蛋白浓缩后的**终浓度不超过

20mg/ml。对于对浓缩速度敏感而容易沉淀的蛋白,建议的改进方法是:

1)离心力降为推荐离心力的30%-50%

2)改用截留分子量更大的超滤管(如原本选用10k,此时可以选择30k) 3)在浓缩过程中取出超滤管,用***头反复吹吸几次后再继续浓缩

Amicon® Ultra超滤膜中含有微量甘油。如果出现这种情况,请先用0.1 N NaOH清洗再离心。***用缓冲液或Milli-Q®水再次清洗后甩干。清洗后的滤膜应立即使用,如暂时不用,请保持润湿状态,避免重新干燥。

外泌体用于细胞学或动物实验前的无菌处理

已经经过上述方法制备的外泌体在进行细胞或动物实验之前还需进行一步除菌过滤,这个时候考虑到得率,应该采用离心法处理,以减少过滤时的外泌体样品损失。

超滤方法纯化具体操作步骤举例

Amicon® Ultra-15 超滤管 (10 kDa MWCO)

用Steriflip®真空抽滤对样品进行澄清[目录号SCGP00525; 0.22 μm Millipore Express PLUS (PES)膜]

用PBS平衡Amicon® Ultra-15 超滤管(目录号UFC901024,10 kDa MWCO) ,4000g离心 X 10 min。

从超滤管内管及收集管吸走PBS。向超滤管加入15 mL 样品。4000g 离心30 min 浓缩。倒空收集管。加入14 mL PBS 进行缓冲液置换,温柔吸打样品数次。4000g离心 30 min。从浓缩管吸回处理好的样品。(30X 浓缩)

注意 : 所有 Amicon® Ultra 超滤管 (0.5, 2, 4 和 15 mL) 与此操作流程兼容 * 一个好的 超滤浓缩管代理销售需要具备哪些特点您知道吗?

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样品的澄清、过滤和除菌

Ultrafree®-MC和Ultrafree®-CL微滤管

Ultrafree®-MC(0.5mL)和Ultrafree®-CL(2mL)是一次性使用的微滤离心管,可以用于各种水性样品和在某些溶剂中的样品除颗粒物、除沉淀的处理。提供两种体积及多种膜孔径以及已经经过无菌处理的产品供选择。Ultrafree®微滤离心管操作简便、样品回收率高且重复性很好,是蛋白和核酸样品处理的理想选择。

特点与优点

有0.1-5.0μm五种膜孔径供选择

采用高回收率的亲水Durapore® (PVDF)膜和亲水PTFE膜

提供无菌包装和非无菌包装形式产品

过滤速度快,数据稳定、重现性好

上样体积为0.5mL (MC)或2mL (CL)

配合1.5mL离心管固定转子(MC)或15mL离心管转子使用

顶盖颜色标识易于区分膜孔径 益启生物公司专业 从事超滤浓缩管代理销售。黄浦区默克离心浓缩管参数

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对于慢***推荐Amicon® Ultra 100kDa; 对于腺***推荐Amicon® Ultra 50kDa。具体的操作步骤可以参考***浓缩纯化试剂盒FTLV00003和FTAV00003的产品使用说明书。另提供AAV(腺相关***)的制备方法供参考。

去污剂因其独特的性质,当浓度大于临界微团浓度(Critical Micelle Concentration, CMC)时,去污剂分子会聚集形成微团而改变分子构象,这有可能会影响去污剂的去除效果。

Amicon® Ultra超滤膜含有微量甘油。如果此成分干扰分析,可用缓冲液或Milli-Q®水预清洗。如果干扰仍然存在,用0.1 N NaOH清洗,然后用缓冲液或Milli-Q®水再次清洗后甩干。 南京默克4ml超滤浓缩管报价

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